选择圆环苗别再迷信抗原含量了,这些因素也很重要!

仅仅通过TCID50或者Cap蛋白含量测定只能表示疫苗中“有效抗原”的理论值,并不能完全指示出“有效抗原”的含量。所谓“有效抗原”,指的是能引起机体产生有效免疫反应的抗原,对圆环病毒来说,就是能引起机体产生抵抗圆环病毒免疫反应的抗原。只有能完整展示病毒天然构象的抗原才是有效抗原。

选择圆环苗别再迷信抗原含量了,这些因素也很重要!


圆环疫苗的市场竞争一年比一年激烈,与早些年相比,厂家已经从价格上的竞争提升到质量指标上的竞争。而在质量指标上,诸多厂家围绕着做文章的,又以抗原含量、TCID50数量级为甚。为表示产品抗原含量高,宣传的TCID50从7飙高到8。那么实际上这些硬数字与圆环疫苗的效果之间有多大关联?哪些抗原能真正刺激机体免疫应答呢?好的圆环疫苗又应该具备怎样的素质?



圆环疫苗抗原含量与效果的关系



有效抗原含量是衡量疫苗质量的一项基本内容。有效抗原的含量与圆环疫苗的免疫持续时间、免疫产生速度都有关,因此也是厂家制苗所关注的重点。


细胞半数感染量(TCID50)是衡量全病毒疫苗病毒量的指标之一,对于全病毒疫苗来说,产品说明书上都会标明灭活前TCID50以表示抗原含量。而对基因工程疫苗来说,是利用载体表达圆环病毒引起免疫应答的主要抗原——cap蛋白作为疫苗抗原,因此是以cap蛋白含量(μg/ml)为抗原含量标准。


但是实际上,TCID50并不能绝对地反映疫苗的免疫源性,哈尔滨兽医研究所研究员刘长明指出,TCID50只能评价疫苗半成品状态下的病毒滴度,在灭活过程中可能会出现抗原含量降低、失活等情况,对于成品质量评价没有直接意义,只能作为参考。而南京农业大学教授姜平也认为,TCID50只是全病毒灭活苗抗原含量的一种表示方法,用最小免疫剂量来衡量圆环疫苗有效抗原含量更科学。


浙江大学动物科学院邢刚博士则介绍,采用TCID50的方法进行评价的时候,由于不同种毒在不同细胞系上面的感染率差别很大,普通PK细胞感染率在20%-30%,但使用克隆化的细胞感染率可达到90%以上。因此TCID50不能作为通用的标准来衡量抗原含量,疫苗生产过程中标准也不尽相同,有的甚至相差200倍。


亚单位疫苗则是以Cap蛋白的含量来评价抗原含量。但是大家必须注意半成品和成品的区别,Cap蛋白含量虽然可通过电泳进行相对准确的测定,但重组蛋白也存在失活和变性的问题,青岛易邦的易圆净不仅对对半成品和成品进行有效蛋白的检测,同时还对成品有效抗原的空间结构(病毒样颗粒)进行监测,以保证疫苗的免疫活性和效果。



能展示病毒完整空间构象的抗原才是有效抗原



通过以上专家观点分析不难得出,仅仅通过TCID50或者Cap蛋白含量测定只能表示疫苗中“有效抗原”的理论值,并不能完全指示出“有效抗原”的含量。所谓“有效抗原”,指的是能引起机体产生有效免疫反应的抗原,对圆环病毒来说,就是能引起机体产生抵抗圆环病毒免疫反应的抗原。只有能完整展示病毒天然构象的抗原才是有效抗原,因为机体识别的不是一段氨基酸的序列,而是通过折叠、修饰形成的空间结构,就像钥匙识别锁。对此姜平也表示,“无论是全病毒疫苗还是基因工程苗,归根结底是要看生产工艺,全病毒疫苗需要保持好病毒粒子的免疫原性,基因工程苗要做出类病毒颗粒。”


青岛易邦猪圆环病毒2型基因工程亚单位疫苗VLPs电镜图片

表达完整类病毒颗粒,展现天然空间构象



好的圆环疫苗应该具备的条件



南京农业大学动物医学院教授李玉峰认为评价圆环病毒,至少要看三个方面的条件,有效抗原浓度只是一方面,此外还有纯度和佐剂。这三个条件符合了,这个圆环苗才能被认为是好的。“有人问,圆环疫苗之间的效果差别在哪?我举一个很简单的例子,你的抗原浓度是别人的的90%,抗原纯度也是90%,佐剂性能也是90%,3个90%乘下来是多少?差不多就是70%了。”李玉峰认为衡量一个圆环病毒疫苗好坏无论是全病毒还是基因工程,都要关注纯度和佐剂。实际上这也是业内专家的共识。


谈到纯度,其实也是保障有效抗原的一环。无论是全病毒灭活疫苗还是基因工程苗,都需要进行抗原提纯的步骤。这是因为在病毒培养或者抗原表达的过程中,都不可避免地会存在杂质,在制苗过程中需要将目标抗原从细胞或载体中提取出来,尽量减少杂质的成分。如果一个圆环疫苗仅仅追求抗原浓度,而不注重提纯,那么反而会导致抗原浓度越高效果越差。抗原被浓缩了,杂质也跟着被浓缩,那么杂质引起的应激和造成的免疫资源的浪费会更加的严重。因此,一个好的圆环疫苗在追求抗原含量的同时,要更加注重纯净性,据了解青岛易邦的易圆净其有效抗原的纯度达到了80%以上。


而关于佐剂对于疫苗的重要性已经众所周知,佐剂最初也最核心的作用在于帮助抗原刺激机体产生免疫应答。如果说抗原是烧火的柴,那么佐剂是助燃的油,机体的抗原递呈细胞是小小的火苗,光点柴很难烧得起来。可见佐剂对激发机体的免疫应答,增强免疫效果有关键作用。好的疫苗,必然拥有刺激免疫应答能力强的佐剂。圆环病毒是世界上最小的病毒之一,自身无囊膜只有衣壳,免疫原性差其对于佐剂需求更加苛刻,所以,优质佐剂对提高疫苗的免疫原性可以起到非常显著的作用,不同的佐剂造成的免疫效果差异也会非常大。


而近年来随着科技进步,疫苗赋予佐剂的功能越来越丰富,对佐剂的要求也越来越高。猪场关注疫苗产生保护的时间和保护的持续期,这就使得如今的佐剂不但需要刺激免疫应答产生,还要能起到缓释作用,增强免疫持续时间,使机体的免疫反应过程更加平滑。而作为一个免疫刺激因子,佐剂又不能让机体产生过强的应激反应,保障安全性,这是佐剂应用的基础。只有在这个安全的基础上,才能再进一步考虑有效的问题。


而无论嘴上讲的多厉害的指标,最终都要凭临床效果验证。疫苗好不好,还是得看实践,看性价比。通过对比猪群中病毒血症的降低、饲料转化率的提高、呼吸道疾病的发病率下降程度、以及猪只增重情况等评估,最终选择适合自己的圆环苗。